Oroboros Oxygraph2k高精度/高分辨率细胞能量代谢分析系统

线粒体病(mitochondrial disorders)是遗传缺损引起线粒体代谢酶缺陷，致使ATP合成障碍、能量来源不足导致的一组异质性病变。线粒体是密切与能量代谢相关的细胞器，无论是细胞的成活(氧化磷酸化)和细胞死亡(凋亡)均与线粒体功能有关，特别是呼吸链的氧化磷酸化异常与许多人类疾病有关。随着线粒体生理和线粒体呼吸病理研究的发展，越来越需要高分辨率、高精准的仪器对分离的线粒 体、培养的细胞、组织样本以及活检样本进行呼吸代谢研究。

Oroboros Oxygraph2k是目前国内外都了解的细胞能量代谢测量/分析产品，该系统通过高精度的极谱氧电极和全功能的荧光技术实现对样本的线粒体呼吸功能以及生物体的能量代谢进行精准定量及分析。Oroboros Oxygraph2k已经成为国际线粒体研究的标准。随着多功能细胞呼吸代谢生理监测仪Oroboros O2K的广泛大量地使用，其应用范围也早已扩展到几乎所有与细胞或线粒体能量代谢相关的领域。
Oroboros Oxygraph2k检测指标：耗氧量、PH值、活性氧产生、分离线粒体、线粒体膜电位、渗透组织、ATP、完整和通透性细胞、组织匀浆、钙离子、自由基等指标。可进行单一参数监测分析以及多参数实时记录分析并可对温度、搅拌速度等条件进行控制。

Oroboros Oxygraph2k应用领域：
病理现像导致的呼吸微弱（细胞凋亡，线粒体或新陈代射疾病，老化，离体-再灌注损伤，过氧应激）

活检取样，样品量比较少（尢其是那些诊断遗传疾病和线粒体疾病的儿科病人）
量比较少的细胞培养
突变导致呼吸能力下降
氧化率和抗氧化能力检测（质量控制）
低水平吸吸检测，生理细胞内氧水平或氧活性

产品型号：
O2k-FluoRespirometer（含荧光检测系统）
O2k-Respirometer (不含荧光检测系统）



技术优势：
?  电极检测方法
?  实验使用试剂开放，无实验耗材消耗
?  封闭性检测环境，可进行低氧/常氧/高氧实验
?  拥有加热/制冷模块，可实现电子控温
?  定量检测方式，直接检测样本消耗O₂的含量
?  具有搅拌系统的检测腔，确保腔室内样本溶液均匀






实验目的：为探究不同浓度解耦联剂FCCP对细胞氧耗率OCR的影响。
细胞经氧化磷酸化抑制剂寡酶素处理后，细胞的耗氧率显著降低，使细胞呼吸达到Leak水平。
实验第30分钟开始加入0.5uM  FCCP，并每间隔120秒逐量增加0.5uM.
实验数据结果显示，随着FCCP浓度的不断增加，细胞耗氧量呈现显著增加，并且在FCCP浓度加入剂量为5.5uM时达到最大值，
而再增加浓度并不会使细胞耗氧率出现显著增加，这表明FCCP的最佳浓度为5.5uM。




实验目的为了解细胞的能量代谢机制
实验样本为不同量的人类股外侧肌组织，将样本A 3.4mgW_w组织与样本B 2.8mgW_w 组织分别置于双通道的细胞代谢测量分析系统中，并分别加入苹果酸、辛酰肉碱、ADP、谷氨酸、琥珀酸、鱼藤酮、丙二酸、粘噻唑、以及抗霉素等，观察细胞的耗氧情况。红色曲线为样本A，绿色曲线为样本B，实验数据显示不同量样本加入相同剂量的药物后耗氧率基本相同。




测量细胞为小鼠骨髓癌细胞
实验中使用TIP 2k微型滴定泵加入解耦联剂FCCP，实验设定滴定间隔120秒，循环滴定15次，每次逐量增加0.5uM，加药浓度从0.5uM-7.5uM。耗氧率随解耦联剂FCCP的不同浓度的变化而不同；O₂含量逐步下降。




实验为测量小鼠心肌细胞的耗氧率与H₂O₂之间的相互作用
实验中分别添加活性氧、琥珀酸盐、谷氨酸、ADP、寡霉素、FCCP以及细胞色素C，实验设置为不同实验样本中加入药物的剂量相同，但顺序不同，实验数据显示不同的药物添加顺序对细胞代谢、氧化磷酸化过程产生了不同的影响。（蓝色曲线为氧含量；红色为耗氧量变化曲线；绿色为H₂O₂变化曲线。）



参考文献：

• 展示了与自闭症和精神分裂症有关的人类CYFIP1同源基因的果蝇突变体表现出线粒体过度活跃和群体行为的改变。
  Kanellopoulos AK, Mariano V, Spinazzi M, Woo YJ, McLean C, Pech U, Li KW, Armstrong JD, Giangrande A, Callaerts P, Smit AB, Abrahams BS, Fiala A, Achsel T, Bagni C (2020) Aralar sequesters GABA into hyperactive mitochondria, causing social behavior deficits. Cell 180:1178-97.
   

• 低剂量的药物就可转换成有益的抗NASH（非酒精性脂肪性肝炎）的疗法
  Jian C, Fu J, Cheng X, Shen LJ, Ji YX, Wang X, Pan S, Tian H, Tian S, Liao R, Song K, Wang HP, Zhang X, Wang Y, Huang Z, She ZG, Zhang XJ, Zhu L, Li H (2020) Low-dose sorafenib acts as a mitochondrial uncoupler and ameliorates nonalcoholic steatohepatitis. Cell Metab 31:892-908.
   

• 线粒体在移植过程中无法抵抗钙超载
  Bertero E, O'Rourke B, Maack C (2020) Mitochondria do not survive calcium overload during transplantation. Circ Res 126:784-86.
   

• 使用替代氧化酶绕过线粒体复合物III会抑制急性肺氧感测
  Sommer N, Alebrahimdehkordi N, Pak O, Knoepp F, Strielkov I, Scheibe S, Dufour E, Andjelekovic A, Sydykov A, Saraji A, Petrovic A, Quanz K, Hecker M, Kumar M, Wahl J, Kraut S, Seeger W, Schermuly RT, Ghofrani HA, Ramser K, Braun T, Jacobs HT, Weissmann N, Szibor M (2020) Bypassing mitochondrial complex III using alternative oxidase inhibits acute pulmonary oxygen sensing. Sci Adv [Epub ahead of print].
   

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  学术优势： 
  使用O2k产品发表的文章多达800多篇！发表过的杂志包括《Cell》、《Nature Genetics》、《Diabetes》等！ 
  
  
  服务优势：
  Oroboros公司是一家集仪器制造，销售，线粒体研究培训为一体的技术型公司，公司每年定期举办线粒体研究培训班，与客户一起建立一个线粒体研究网站是Oroboros公司的发展理念。